- 基因測(cè)序
1 技術(shù)原理
基因測(cè)序技術(shù)能鎖定個(gè)人病變基因,提前預(yù)防和治療。
自上世紀(jì)90年代初,學(xué)界開始涉足“人類基因組計(jì)劃”。而傳統(tǒng)的測(cè)序方式是利用光學(xué)測(cè)序技術(shù)。用不同顏色的熒光標(biāo)記四種不同的基因,然后用激光光源去捕捉熒光信號(hào)從而獲得待測(cè)基因的序列信息。
雖然這種方法檢測(cè)可靠,但是價(jià)格不菲也是有目共睹的,一臺(tái)儀器的價(jià)格大約在50萬(wàn)到75萬(wàn)美元,而檢測(cè)一次的費(fèi)用也高達(dá)5千到1萬(wàn)美元。
最新的基因測(cè)序儀中,芯片代替了傳統(tǒng)激光鏡頭、熒光染色劑等,芯片就是測(cè)序儀。
通過(guò)半導(dǎo)體感應(yīng)器,儀器對(duì)DNA復(fù)制時(shí)產(chǎn)生的離子流實(shí)現(xiàn)直接檢測(cè)。當(dāng)試劑通過(guò)集成的流體通路進(jìn)入芯片中,密布于芯片上的反應(yīng)孔立即成為上百萬(wàn)個(gè)微反應(yīng)體系。
這種技術(shù)組合,使研究人員能夠在短短2小時(shí)內(nèi)獲取基因信息。而使用傳統(tǒng)的光學(xué)測(cè)序技術(shù)需等待數(shù)周乃至數(shù)月后才能得到結(jié)果。同時(shí),檢測(cè)一次的費(fèi)用也降到了最低1千美元。
2 操作設(shè)備
過(guò)長(zhǎng)的測(cè)序周期以及上萬(wàn)美元的儀器成本,成了阻礙基因測(cè)序進(jìn)入尋常百姓家的障礙。而運(yùn)用新技術(shù)的基因測(cè)序儀大大降低了基因組測(cè)序的門檻,使得更多研究人員能夠使用這項(xiàng)技術(shù)開發(fā)多種應(yīng)用。
總部位于美國(guó)加州的生命技術(shù)公司(Life Technologies),最近正在中國(guó)推出臺(tái)式基因測(cè)序儀Ion Proton,并稱這款產(chǎn)品可在一天時(shí)間內(nèi)完成個(gè)人全基因組測(cè)序。這意味著基因測(cè)序技術(shù)有望走進(jìn)臨床實(shí)踐,普通老百姓也能得知自己的基因序列。 但是,這款產(chǎn)品還未獲得FDA(美國(guó)食品及藥物管理局)和SFDA(中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局)的權(quán)威認(rèn)證,其具體作用還有待檢驗(yàn)。
3 主要功能
基因測(cè)序只是基因檢測(cè)的方法之一,其又叫基因譜測(cè)序,是國(guó)際上公認(rèn)的一種基因檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。
基因測(cè)序廣為人知的還有針對(duì)唐氏綜合征篩查的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)。只需要孕婦5毫升血,通過(guò)化驗(yàn)血液中甲型胎兒蛋白(AFP)、人類絨毛膜促性腺激素(β-hCG)的濃度,就可以算出胎兒出現(xiàn)唐氏綜合征的危險(xiǎn)性。
最近公眾關(guān)注的H7N9,就是中國(guó)科學(xué)家通過(guò)基因測(cè)序等技術(shù)手段,發(fā)現(xiàn)的一種新型重配禽流感病毒。
近年間,基因測(cè)序從實(shí)驗(yàn)室走入臨床,甚至逐漸成為全球醫(yī)學(xué)界熱門的話題。其中一個(gè)很重要的原因,是“名人效應(yīng)”,蘋果公司創(chuàng)始人喬布斯和影星安吉麗娜·朱莉都曾采用基因測(cè)序方法希望抵御癌癥的侵襲,朱莉還為此預(yù)防性地切除自己的乳房。喬布斯雖然仍因癌癥去世,但他生前接受的全基因測(cè)序,已成為很多國(guó)家富人追捧的高端體檢服務(wù)。
4 應(yīng)用領(lǐng)域
英國(guó)倫敦大學(xué)學(xué)院和美國(guó)羅格斯大學(xué)的聯(lián)合研究團(tuán)隊(duì),將基因測(cè)序技術(shù)和超級(jí)計(jì)算機(jī)技術(shù)相結(jié)合,試圖探索解決這一命題。研究人員把艾滋病(HIV)蛋白酶分子作為對(duì)象,酶在不同人體中形狀略有不同,尤其是在蛋白質(zhì)活動(dòng)區(qū),在那里酶完成切片并構(gòu)成了下一個(gè)病毒,進(jìn)而形成特定的病毒基因序列。如果知道了酶的形狀,就可以找到相應(yīng)的藥物來(lái)阻止這一過(guò)程。研究人員通過(guò)模擬人體中不同形狀的艾滋病病毒感染的關(guān)鍵蛋白質(zhì),演示了由計(jì)算機(jī)優(yōu)化給出的多種艾滋病治療藥物療效的排序清單。英國(guó)倫敦大學(xué)學(xué)院的皮特.柯文尼教授稱:“有可能通過(guò)病人的基因組序列,推斷出酶的形狀,構(gòu)建準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu),篩選匹配藥物,并將結(jié)果告訴主治醫(yī)生給出最優(yōu)處方。”目前,研究團(tuán)隊(duì)已采用這一思路,對(duì)市場(chǎng)上在用的9種艾滋病治療藥物中的7種進(jìn)行了排序驗(yàn)證。
科學(xué)家表示實(shí)際工作遠(yuǎn)比看起來(lái)復(fù)雜。目前他們建立的50多個(gè)模擬模型,就要配有5000個(gè)處理器的計(jì)算機(jī)不停的計(jì)算12-18個(gè)小時(shí),還要對(duì)計(jì)算結(jié)果做大量的數(shù)據(jù)分析,才能給出藥物的排序。今天的通用計(jì)算機(jī)技術(shù)很難勝任這樣的工作,樂(lè)觀的看,依當(dāng)前計(jì)算機(jī)技術(shù)發(fā)展速度看,也許十年后真能實(shí)現(xiàn)計(jì)算機(jī)為病人“抓藥”。
5 產(chǎn)生背景
史蒂夫·喬布斯曾接受過(guò)全基因測(cè)序
基因測(cè)序,本是一種實(shí)驗(yàn)室研究技術(shù)手段,因“名人效應(yīng)”應(yīng)用于高端體檢、產(chǎn)前診斷等領(lǐng)域,價(jià)格不菲?;驕y(cè)序最廣為人知的,是影星安吉麗娜·朱莉通過(guò)基因檢測(cè),選擇手術(shù)切除乳腺以降低患乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)。2011年去世的蘋果公司創(chuàng)始人史蒂夫·喬布斯患癌時(shí),也曾接受過(guò)全基因測(cè)序。
基因測(cè)序挽救兩兄妹
1996年,一對(duì)雙胞胎出生了,男孩叫諾亞,女孩叫艾麗西斯。然而,他們的行為舉止與別的孩子有所不同。從回到家的那天起,這對(duì)雙胞胎就開始腹痛,并且一天要嘔吐好幾次。
在孩子們兩歲的時(shí)候,他們被確診為腦癱。在精心的治療和護(hù)理之下,這對(duì)雙胞胎的病情似乎得到了控制。然而,5歲半的時(shí)候,雙胞胎的病情又開始惡化。女孩艾麗西斯的眼珠開始上翻,手也無(wú)法正常下垂;男孩諾亞則是一天24小時(shí)地不斷嘔吐。他們甚至無(wú)法像正常人一樣走路、說(shuō)話。
此后,雙胞胎的病情又幾次反復(fù),一直沒有找到能治愈他們的方法。
2003年,機(jī)緣巧合,這對(duì)雙胞胎和他們的哥哥以及父母進(jìn)行了一次基因測(cè)序。經(jīng)過(guò)對(duì)比分析,最終發(fā)現(xiàn)雙胞胎致病的罪魁禍?zhǔn)资求w內(nèi)一種還原酶發(fā)生了基因突變。它破壞了產(chǎn)生多巴胺以及其他兩種神經(jīng)遞質(zhì)的細(xì)胞途徑。
找到病因后,醫(yī)生立刻做出了精確的治療方案。一個(gè)月后,這對(duì)雙胞胎被治愈。讓這對(duì)雙胞胎重獲健康的,便是來(lái)自于生命技術(shù)公司的基因測(cè)序技術(shù)。
鎖定病變基因
基因測(cè)序雖然并不是個(gè)陌生的名詞,但是大家并沒有將它與自己的生活聯(lián)系到一起。實(shí)際上,便捷的基因測(cè)序?qū)ι钇焚|(zhì)的提升大有裨益。
由于成本和技術(shù)的原因,現(xiàn)階段對(duì)于同一種疾病的基因篩查,不管篩查者屬于高風(fēng)險(xiǎn)還是低風(fēng)險(xiǎn)的人群,他們都選用同一種模式進(jìn)行篩查。而實(shí)際上,應(yīng)該采用有針對(duì)性的篩查方式,高風(fēng)險(xiǎn)的人群多查,低風(fēng)險(xiǎn)的少查。
而這種針對(duì)性的檢測(cè),還能挽救人的生命。首都師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院許興智告訴記者,如果運(yùn)用得當(dāng),在臨床治療中,將非常有益。利用基因測(cè)序的報(bào)告,醫(yī)生可以有針對(duì)性地對(duì)患者進(jìn)行靶向治療。
我們可以設(shè)想一下,個(gè)性化的基因檢測(cè)應(yīng)用后,醫(yī)生可以拿到腫瘤患者的基因。
本·拉登身份靠基因技術(shù)確認(rèn)
“除了人類的基因測(cè)序,測(cè)序儀還有很廣泛的應(yīng)用。”戴爾·帕特森說(shuō),比如醫(yī)療研究、法醫(yī)鑒定、農(nóng)作物研究、動(dòng)物健康、食品安全等多個(gè)領(lǐng)域,都可以是測(cè)序儀大展拳腳的舞臺(tái)。
在抓捕本·拉登時(shí),測(cè)序儀就幫上了大忙。美國(guó)海軍特種部隊(duì)在巴基斯坦首都伊斯蘭堡擊斃了拉登。除了震驚之外,很多民眾好奇美軍是如何確定拉登的身份的。利用生命技術(shù)公司提供的基因測(cè)序技術(shù),美軍和美國(guó)中央情報(bào)局首先提取了拉登的DNA,然后再將DNA與來(lái)自拉登家人的DNA參照樣本對(duì)比,最終確定了拉登的身份。
6 主要問(wèn)題
基因測(cè)序是把雙刃劍
基因測(cè)序雖然是一種很好的治療手段,但是中國(guó)科學(xué)院北京基因組研究所教授甄二真表示,目前從應(yīng)用的角度來(lái)說(shuō),科學(xué)家只確定了極少數(shù)的基因位點(diǎn)與極少疾病的確切關(guān)系,也就是說(shuō)真正可以用于臨床診斷和指導(dǎo)治療的基因檢測(cè)并不多。要想真正用基因來(lái)診病,還需要時(shí)間。[5]
基因測(cè)序就像一把雙刃劍,如果運(yùn)用得不得法,它也有消極的一面。若全基因的檢測(cè)普及,含有基因缺陷的人的信息,一旦落入保險(xiǎn)公司或者被測(cè)者雇主的手中,將對(duì)他的生活產(chǎn)生不良影響。
而且基因測(cè)序并不是個(gè)性化治療的唯一基礎(chǔ),其他還包括基因治療等其他技術(shù)基礎(chǔ)。另外,目前確定疾病基因位點(diǎn)的方法很多,相對(duì)于測(cè)序技術(shù)及也有很多同樣便宜和快捷的。更重要的是,對(duì)于任何基因測(cè)序的設(shè)備來(lái)說(shuō),用于臨床前必須對(duì)其可靠性和可重復(fù)性做好完備的臨床試驗(yàn),并且取得FDA和SFDA的權(quán)威認(rèn)證。
7 法律規(guī)定
在網(wǎng)上搜索“基因測(cè)序”,能看到多家醫(yī)療機(jī)構(gòu)、體檢中心,甚至公司提供的體檢套餐,內(nèi)容覆蓋腫瘤、高血壓、糖尿病等基因檢測(cè),價(jià)格從數(shù)百元到數(shù)萬(wàn)元不等。
只需一滴血或一點(diǎn)唾液,就能預(yù)測(cè)罹患多種疾病,如癌癥或白血病,國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局、中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)聯(lián)合發(fā)出通知,要求在相關(guān)準(zhǔn)入標(biāo)準(zhǔn)、管理規(guī)范出臺(tái)以前,任何醫(yī)療機(jī)構(gòu)不得開展基因測(cè)序臨床應(yīng)用;已經(jīng)開展的,要立即停止。
“基因測(cè)序相關(guān)產(chǎn)品和技術(shù)已由實(shí)驗(yàn)室研究演變到臨床使用,對(duì)此,國(guó)務(wù)院有關(guān)部門高度重視。”國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局和中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)經(jīng)過(guò)調(diào)查研究,正在組織相關(guān)領(lǐng)域?qū)<艺撟C。
部委叫停
2014年2月17晚,國(guó)家食藥總局相關(guān)負(fù)責(zé)人坦言,基因測(cè)序的臨床應(yīng)用多出現(xiàn)于醫(yī)療機(jī)構(gòu)和體檢中心的高端體檢,但其使用的基因測(cè)序儀及相關(guān)診斷試劑和軟件,很多沒有經(jīng)過(guò)醫(yī)療器械的注冊(cè)審批。
北京市健康管理協(xié)會(huì)會(huì)長(zhǎng)杜兵2014年2月17日晚表示,基因測(cè)序不在北京市衛(wèi)生行政部門審批準(zhǔn)入的醫(yī)療技術(shù)項(xiàng)目之列,物價(jià)部門也沒有收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。
安全風(fēng)險(xiǎn)
國(guó)家食藥總局2014年2月26日回應(yīng)基因測(cè)序技術(shù)“叫停”一事,稱基因測(cè)序是基因檢測(cè)領(lǐng)域的一項(xiàng)新技術(shù),雖然速度快、成本低,但也因尚未經(jīng)過(guò)監(jiān)管部門的系統(tǒng)評(píng)價(jià)、準(zhǔn)入,尚存安全性、有效性風(fēng)險(xiǎn)。
國(guó)家食藥總局還表示,國(guó)內(nèi)已有多家企業(yè)從事基因測(cè)序相關(guān)產(chǎn)品的研究,并應(yīng)用于臨床,還有擴(kuò)大趨勢(shì),但這些產(chǎn)品無(wú)一通過(guò)國(guó)家對(duì)醫(yī)療器械的審評(píng)審批和注冊(cè),依法應(yīng)叫停其臨床使用。兩部委聯(lián)合“叫停”基因測(cè)序技術(shù)臨床應(yīng)用引發(fā)輿論關(guān)注。
各國(guó)對(duì)基因測(cè)序多審慎推進(jìn)
PCR、生物芯片等基因檢測(cè)技術(shù)早已在臨床廣泛應(yīng)用,其臨床使用產(chǎn)品作為醫(yī)療器械,無(wú)論在國(guó)內(nèi)外都有批準(zhǔn)。國(guó)家食藥總局醫(yī)療器械注冊(cè)司相關(guān)負(fù)責(zé)人介紹,從2008年至今,我國(guó)已陸續(xù)批準(zhǔn)多種可用于基因檢測(cè)的產(chǎn)品及配套儀器,如遺傳性耳聾基因檢測(cè)試劑、人乳頭瘤病毒(HPV)DNA檢測(cè)試劑,及臨床使用的與腫瘤個(gè)體化用藥相關(guān)基因突變檢測(cè)相關(guān)的多種試劑。
然而,作為當(dāng)代基因檢測(cè)技術(shù)的研究前沿,(第二代)基因測(cè)序技術(shù)及產(chǎn)品問(wèn)世以來(lái),各國(guó)衛(wèi)生健康和食品藥品監(jiān)管部門對(duì)其在臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用和發(fā)展無(wú)不關(guān)注,但多采取審慎推進(jìn)態(tài)度。以美國(guó)為例,直到2013年11月,美國(guó)食品藥品管理局(FDA)才批準(zhǔn)首個(gè)應(yīng)用二代測(cè)序技術(shù)的用于“囊性纖維化疾病”的診斷產(chǎn)品,包括相關(guān)的儀器及試劑。同樣,在我國(guó),上述負(fù)責(zé)人表示,國(guó)家尚未批準(zhǔn)注冊(cè)過(guò)基于(第二代)基因測(cè)序技術(shù)的相關(guān)醫(yī)療器械。
申請(qǐng)注冊(cè)需先開展臨床試驗(yàn)
基因測(cè)序診斷相關(guān)產(chǎn)品包括基因測(cè)序儀、相關(guān)診斷試劑和軟件。國(guó)家食藥總局介紹,用于臨床檢測(cè)的基因測(cè)序儀、診斷軟件產(chǎn)品,應(yīng)按照《醫(yī)療器械注冊(cè)管理辦法》的相關(guān)程序和要求申請(qǐng)注冊(cè);相關(guān)體外診斷試劑,可按照《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法(試行)》申請(qǐng)注冊(cè)。上述產(chǎn)品申請(qǐng)審批注冊(cè),還需要先在醫(yī)療機(jī)構(gòu)開展一定樣本數(shù)的臨床試驗(yàn),以驗(yàn)證安全性和有效性。
為鼓勵(lì)醫(yī)療器械的研究和創(chuàng)新,國(guó)家食藥總局2014年2月還印發(fā)了《創(chuàng)新醫(yī)療器械特別審批程序(試行)》。昨天,國(guó)家食藥總局在回應(yīng)中表示,若申請(qǐng)注冊(cè)的基因測(cè)序臨床診斷產(chǎn)品符合創(chuàng)新醫(yī)療器械定義,可按照“早期介入、專人負(fù)責(zé)、科學(xué)審批”的原則,在標(biāo)準(zhǔn)不降低、程序不減少的前提下優(yōu)先審評(píng)審批,“支持、鼓勵(lì)前沿技術(shù)和產(chǎn)品在通過(guò)安全性、有效性評(píng)價(jià)的基礎(chǔ)上盡早惠及公眾”。
8 發(fā)展?fàn)顩r
國(guó)外
美國(guó)由多個(gè)財(cái)團(tuán)共同投資組建的某生物高科技產(chǎn)業(yè)公司,一直專注于生物高科技領(lǐng)域的研發(fā)與服務(wù)。集團(tuán)擁有非常雄厚的實(shí)力,同時(shí)在全美涉足多個(gè)領(lǐng)域的發(fā)展。其中一家財(cái)團(tuán)擁有3家電子芯片高科技公司,擁有60多位全美一流的科研人員,擁有13個(gè)博士,并有3個(gè)諾貝爾獎(jiǎng)獲得者;另外的財(cái)團(tuán)一家擁有的能源公司在美國(guó)落基山脈地區(qū)的7個(gè)州涉足石油的開采開發(fā)貿(mào)易;另一家擁有的農(nóng)業(yè)開發(fā)在美國(guó)西部屬于最大的農(nóng)場(chǎng)之一。
“21世紀(jì)是基因的世紀(jì)”。隨著基因技術(shù)的不斷突破,個(gè)體通過(guò)檢測(cè)基因來(lái)預(yù)知自己的未來(lái)健康狀況,有針對(duì)性地進(jìn)行保健和治療,顛覆了傳統(tǒng)的健康觀念,幫助人們從被動(dòng)預(yù)防治療走向主動(dòng)預(yù)知健康,這是一次醫(yī)學(xué)史上的全新改變。權(quán)威調(diào)查顯示,基因檢測(cè)市場(chǎng)比保健市場(chǎng)更為龐大,未來(lái)將達(dá)到幾百萬(wàn)億美元的市場(chǎng)。美國(guó)2007年有500萬(wàn)人接受基因檢測(cè),達(dá)到30億美元的市場(chǎng)收益。在英國(guó),基因檢測(cè)已經(jīng)在健康超市出現(xiàn),英美等發(fā)達(dá)國(guó)家基因檢測(cè)就像體檢一樣普及。隨著中國(guó)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和基因檢測(cè)的教育,估計(jì)在中國(guó)基因檢測(cè)的人群在5%左右,每年至少在300萬(wàn)人以上,并在逐年遞增,市場(chǎng)空間極其巨大。
計(jì)劃引進(jìn)應(yīng)用性產(chǎn)品進(jìn)入孵化器,將提供實(shí)質(zhì)性的健康干預(yù)產(chǎn)品,讓人們獲得最個(gè)性化的健康生活方式。
中國(guó)
第三代人類基因測(cè)序關(guān)鍵技術(shù)取得重要進(jìn)展
在人體的基因中,有30億個(gè)堿基對(duì),每個(gè)人的不同,就是由堿基對(duì)排列差異造成的。要想測(cè)出它的全部序列,現(xiàn)在的技術(shù)最少需要兩三個(gè)星期、500萬(wàn)美元。由東南大學(xué)擔(dān)綱的第三代人類基因測(cè)序關(guān)鍵技術(shù)研究取得重要進(jìn)展。
人類基因組計(jì)劃在2003年完成人體全序列的基因測(cè)定,但第一代測(cè)序方法高昂的時(shí)間和經(jīng)濟(jì)成本均令人望而生畏。一代基因測(cè)序方法歷時(shí)12年、耗資數(shù)十億美元,近兩年迅猛發(fā)展的第二代測(cè)序儀讓人類基因組重測(cè)序的費(fèi)用降低到10萬(wàn)美元以下,測(cè)序時(shí)間也縮短到6個(gè)月。但是,這樣的價(jià)格和時(shí)間,對(duì)于個(gè)人用戶來(lái)說(shuō)仍然太高,因而極大地限制了臨床應(yīng)用和基礎(chǔ)理論研究。
9 首次獲準(zhǔn)
2014年7月3日,中國(guó)首次批準(zhǔn)第二代基因測(cè)序診斷產(chǎn)品作為醫(yī)療器械注冊(cè),用于為孕產(chǎn)婦檢測(cè)唐氏綜合征等染色體疾病風(fēng)險(xiǎn),以避免新生兒出生缺陷。
國(guó)家食藥總局昨日表示,經(jīng)審查,批準(zhǔn)BGISEQ-1000基因測(cè)序儀、BGISEQ-100基因測(cè)序儀和胎兒染色體非整倍體(T21、T18、T13)檢測(cè)試劑盒(聯(lián)合探針錨定連接測(cè)序法)、胎兒染色體非整倍體(T21、T18、T13)檢測(cè)試劑盒(半導(dǎo)體測(cè)序法)醫(yī)療器械注冊(cè)。
據(jù)介紹,該批產(chǎn)品可通過(guò)對(duì)孕周12周以上的“高危孕婦”外周血血漿中的游離基因片段進(jìn)行基因測(cè)序,對(duì)部分胎兒染色體異常進(jìn)行無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查和輔助診斷。
不久后,35歲以上,或初次血清學(xué)篩查證實(shí)有“唐氏高危”風(fēng)險(xiǎn)的孕婦,可在醫(yī)院選擇接受無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè),避免“羊水穿刺”、“臍血穿刺”等效率較低、風(fēng)險(xiǎn)較高的產(chǎn)前診斷。
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