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應(yīng)用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)敲除小窩蛋白1基因的神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)建與功能鑒定

中國媒介生物學(xué)及控制雜志 頁數(shù)： 5 2018-08-03
摘要： 目的利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)建立小窩蛋白1(CAV-1)基因敲除的神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株(SH-SY5Y),并驗(yàn)證其對流行性乙型腦炎病毒(JEV)的易感性。方法根據(jù)CRISPR/Cas9靶點(diǎn)設(shè)計(jì)原則,基于人源CAV-1基因的外顯子區(qū)(EXON)序列設(shè)計(jì)小向?qū)NA(sgRNA),將sgRNA連接到載體PX459質(zhì)粒上。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至SHSY5Y細(xì)胞中,使用嘌呤霉素篩...

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